冷胁迫是后果农农作物种植销售量的核心氛围挑战模式中的一个。钙依赖症性血清激酶（CDPKs/CPKs）可将钙（Ca²⁺）数字信号传播到人体细胞并重置对面对困境相应的核心缓解要素，但其调整新机制尚不很清楚。

2025年4月，浙江大学周艳虹教授团队在New Phytologist杂志上发表题为“CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato”的研究论文，揭示了CPK27通过磷酸化HY5促进类黄酮生物合成，从而将冷触发的Ca²⁺信号与类黄酮途径相结合，以增强番茄冷耐受性的分子机制。本文为理解冷信号转导提供了重要策略，拜谱生物为该研究提供了磷碱化呈现位点判断服务。

英文音标主题：CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato（New Phytologist IF：8.3）

常常大标题：CPK27通过磷酸化HY5促进黄酮类化合物的生物合成来增强番茄的耐寒性

雇主机关单位：浙江大学

实验村料：番茄

拜谱展示技术水平：磷硝化作用淡化位点检测工具

调查理念：

一、调查数据

1、CPK27在地温胁迫下展示调整，为了增强学习根系抗冻性

既往不咎探析是因为，CPK27在冷胁迫具体条件下呈现出调涨。为查证一种可是，选文中笔者采用CPK27的两大敲除突变性系（cpk27 #2，#6）做抗冻性测试仪，出现CPK27的转录质量方向同质性不低于参考组（图1a-b）。在CPK27呈现出被治理和改善的观赏植物中，对抗冻性的资料能力同质性弱化。进那步的亚受损肿瘤细胞定位系统与激活开通探析是因为，冷胁迫增进CPK27向受损肿瘤细胞结构积攒，并资料其磷过酸质量方向（图1 f）。免疫系统痕印定量分析进那步确认冷胁迫诱发 CPK27 在核内球蛋白丰度加入、胞内丰度限制，外源CaCl₂治理可组成部分恢愎cpk27的冷皮肤敏感表型，是因为CPK27依靠Ca²⁺电磁波充分发挥能力。（图1g-k）

图1 CPK27以Ca²⁺依赖性方式方法资料番茄耐寒性性

2、CPK27确认监测黄胺类生成经过缓和超高温损害

转录组测序结杲体现 ，CPK27的过表述有明显上涨黄大环内酯生物学制作而成有关系什么是基因组，如CHS、CHI和FLS等，同时黄大环内酯细胞代谢径路有明显丰度。而CPK27什么是基因变异体中这个什么是基因组表述上涨，报错CPK27用提高网站黄大环内酯制作而成辅助茎秆得到缓解较低温度胁迫造成的脱色压差（图2a-e）。

图2 RNA-seq了解CPK27调节管控的冷加载什么是基因

3、HY5是CPK27介导的抗寒走势通道中的关键的靶标

为检验 CPK27 与 HY5 的上下级间目的，编辑第一步骤使用了鲜酵母双杂交育种（Y2H）科学试验，结杲认为这俩者会出现上下级间目的（图3a）。双分子结构荧光互补式（BiFC）科学试验进一步推动骤认为CPK27 与 HY5 在细胞系核内形成上下级间目的（图 3b）。紧接着在免疫抗体共沉垫等能力，发现HY5与CPK27在花草身体内会出现上下级间目的，且这俩者的上下级间目的拥有钙阳离子（Ca²⁺）忽略性（图 3c）。因此，在Co-IP科学试验的核蛋白提现前施加压力冷胁迫外理，结杲界面显示冷胁迫可减弱HY5与CPK27的上下级间目的（图 3d）。

图3 CPK27与HY5互作并磷碱化其首要位点

4、CPK27磷硝化作用HY5资料其转录渗透性，力促黄胺类DNA体现

免疫印迹分析结果发现，冷胁迫处理后CPK27可提高HY5蛋白的磷酸化水平，在体外直接磷酸化 HY5（图 4a-c）。通过磷碱化体现位点测试，发现HY5蛋白的S23和S57两个潜在磷酸化位点。为验证这些位点的功能，作者通过构建非磷酸化突变体，进行磷酸化水平验证，其中双突变体的磷酸化水平下降更为明显（图 4d）。这些结果表明，CPK27 介导的 HY5 磷酸化依赖于 S23 和 S57 这两个特定位点。

图4 CPK27磷过酸HY5并增进其稳固性

5、CPK27 在类黄酮生态学合出径路中反应于HY5的中下游

合理基因遗传表达方法和分泌物进行分析没想到（图5），CPK27在冷胁迫反应阶段中用于HY5的上下游，在调空 HY5 介导的类黄酮生物制品获得环路决定值物抗冻性。

图5 CPK27用于HY5中上游

二、一篇文章工作小结

综上所讲所讲，这篇文实验证明CPK27磷过酸绘制HY5球蛋白，激活卡类黄酮转化成路径，让抗防氧化物品积累更多，必将资料耐热技能。该实验揭示了“Ca²⁺-CPK27-HY5-类黄酮”级联调节管控机制化（图6），表明CPK27介导的HY5磷过酸是进行连接钙数据信号与次生新陈代谢抵抗的首要环节，为谅解苔藓植物磨难运行网络上提供了了新焦距。

图6 CPK27-HY5模块电源不断提高作物耐受力冷胁迫的缘由

三、拜谱总结

本研究利用转录组和磷酸化修饰位点检测等技术，揭示了CPK27通过磷酸化 HY5调控类黄酮生物合成途径，从而在寒冷环境下增强番茄耐寒性的机制，对解析植物应对寒冷的复杂分子调控网络具有重要意义。拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的核胆固醇组学、表达核胆固醇组学、排泄组学、转录组学等几组学物料技术服务，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。欢迎咨询！

参考资料论文资料：Lin R, Zhang W, Tian R, et al. CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato. New Phytol. 2025;246(5):2174-2191. doi:10.1111/nph.70134